曹华杰, 郭新浩, 安志诚, 高兴嘉, 杨军, 陈宁, 范晓光
为提高枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)合成腺苷的能力,该研究以一株腺苷生产菌株B. subtilis XGL作为出发菌株,使用常压室温等离子体诱变(ARTP)技术进行诱变处理,通过深孔板培养和酶标仪快速分析检测筛选高产腺苷菌株。利用Plackett-Burman试验、最陡爬坡试验及响应面试验优化发酵培养基,并采用两阶段溶氧控制策略高效生产腺苷。结果表明,高通量诱变筛选得到高产腺苷菌株XGL85,其摇瓶发酵腺苷产量为11.32 g/L,比出发菌株XGL提高了39.5%,且遗传稳定性较好。菌株XGL85最佳发酵培养基为葡萄糖140 g/L,味精12 g/L,酵母粉18 g/L,葡萄糖酸钠1 g/L,(NH4)2SO4 12 g/L,MgSO4·7H2O 5 g/L,K2HPO4 2 g/L,CaCl2 1.3 g/L,玉米浆15 g/L。在此优化条件下,菌株XGL85摇瓶发酵腺苷产量为17.51 g/L,较未优化前54.7%。菌株XGL85在30 L发酵罐中两阶段溶氧控制发酵45 h,腺苷产量达到51.8 g/L,糖苷转化率达到20.4%。