应用原生质体融合技术选育酱油曲菌——Ⅰ原生质体的制备及营养互补融合

邢来君; 周与良

中国酿造 ›› 1988, Vol. 7 ›› Issue (5) : 11-14.

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应用原生质体融合技术选育酱油曲菌——Ⅰ原生质体的制备及营养互补融合

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摘要

选用生长速度快而蛋白酶活性偏低的Asp?gillus oryzae3.951(沪酿3.042)和蛋白酶活性高而生长速度偏低的A.oryzae10B1菌株,用uv和EMS诱变筛选营养缺陷型,并对缺陷型菌株的原生质体的分离和再生进行了条件实验,采用蜗牛酶和溶壁酶的混合液获得了高产量的原生质体(达到2.5×107/ml)。以30%PEG+0.01M CaCl2+0.05MGly为融合剂,融合温度32℃,融合时间20分钟,进行了原生质体的营养互补融合,融合率达到0.30—0.47%,获得了异核体。融合子在CM上出现绿色的扇形角变,角变菌株为原养型,通过测定其孢子DNA含量和孢子体积确定为融合二倍体。

关键词

营养互补 / 缺陷型 / 原养型 / 蛋白酶活性 / 融合时间 / 角变 / 孢子体 / 异核体 / 再生培养基 / 对氟苯丙氨酸

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邢来君; 周与良. 应用原生质体融合技术选育酱油曲菌——Ⅰ原生质体的制备及营养互补融合[J]. 中国酿造, 1988, 7(5): 11-14
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